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SAP 18双切口酶质粒(h) | sc-404214-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SAP 18双切口酶质粒(h2) | sc-404214-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类基因 SAP18 编码 SAP 18 蛋白,它是 Sin3A/HDAC 转录抑制机制的核心组分之一,可帮助将序列特异性的 DNA 结合因子与组蛋白去乙酰化及染色质压缩相耦联。通过参与依赖 HDAC 的基因沉默过程,SAP 18 影响调控细胞周期控制、分化以及细胞应激反应等的转录程序。SAP18 相关复合体还与 RNA 加工和凋亡信号通路发生交叉,提示其在维持细胞核稳态方面具有广泛作用。包括 SAP18 在内的 Sin3/HDAC 组分的调控异常,已被认为与癌症及其他以转录调控失常为特征的疾病中观察到的表观遗传失衡状态有关。
SAP 18 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SAP18 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SAP18内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SAP18的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SAP18基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。