非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SAP-1a 抗体 (H-3): sc-166823. SK-N-MC (A) 和 Jurkat (B) 全细胞裂解液中 SAP-1a 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SAP-1双切口酶质粒(h): sc-403868-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SAP-1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SAP-1双切酶质粒（h）和SAP-1双切酶质粒（h2）编码针对ELK4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SAP-1a: sc-166823，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SAP-1双切口酶质粒(h) | sc-403868-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SAP-1双切口酶质粒(h2) | sc-403868-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ELK4 编码含 ETS 结构域的转录因子 SAP-1。SAP-1 是血清反应因子（SRF）的共调控因子，可结合血清反应元件中的三元复合体因子（TCF）位点，从而调控即刻早期基因程序。SAP-1 可在 MAPK/ERK 信号通路下游被磷酸化，将有丝分裂原与应激信号与转录输出相连接，进而调控细胞增殖、分化以及刺激依赖性的基因表达。通过调控 FOS 等启动子及其他对生长信号敏感的靶基因，ELK4 促进细胞周期进程并介导对细胞外信号的适应性反应。ETS 因子的活性失衡以及 MAPK 通路连接方式的异常与致癌性转录状态相关，因此 ELK4 是研究疾病相关情境下信号依赖性转录的一个有用节点。
SAP-1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ELK4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ELK4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ELK4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ELK4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。