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SAMD9CRISPR激活质粒(h) | sc-418037-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
SAMD9(无菌α基序结构域含蛋白9)编码一种细胞质蛋白,被认为参与先天免疫调控和细胞增殖控制;已有报道显示其可限制病毒复制并调节干扰素刺激反应。SAMD9 的功能与应激反应程序及影响细胞生长与存活的稳态通路相互交织,这与其被提出的“增殖负调控因子”活性一致。SAMD9 的遗传改变与遗传性骨髓衰竭和免疫缺陷表型相关,并且通过胚系或获得性变异反复见于儿童骨髓增生异常综合征。这些关联使 SAMD9 成为研究炎症耦联的生长控制以及造血细胞体细胞适应机制的有用基因位点。
SAMD9 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SAMD9的表达。
SAMD9 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SAMD9基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SAMD9转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SAMD9表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SAMD9位点,并能够研究内源性位点上依赖于SAMD9的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SAMD9表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SAMD9通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。