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RUNX3双切口酶质粒(m) | sc-419487-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RUNX3双切口酶质粒(m2) | sc-419487-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Runx3 编码转录因子 RUNX3。RUNX3 是一种含 Runt 结构域的 DNA 结合蛋白,可与 CBFβ 形成复合体,调控细胞谱系命运决定、分化以及组织稳态。在小鼠细胞中,RUNX3 整合来自 TGF-β/SMAD 与 Wnt/β-catenin 通路的信号,从而调节控制细胞周期进程、凋亡和免疫细胞发育的转录程序。Runx3 的活性与细胞毒性淋巴细胞成熟和上皮分化尤为相关;其表达或功能的改变与异常增殖及炎症表型有关。这些特性使 Runx3 成为解析发育与疾病相关模型系统中转录调控回路及信号通路串话的一个重要节点。
RUNX3 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Runx3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Runx3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Runx3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Runx3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。