Date published: 2026-7-25

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RIOK2双切口酶质粒(m): sc-426346-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • RIOK2 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • RIOK2双切酶质粒(m)和RIOK2双切酶质粒(m2)编码针对Riok2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    RIOK2双切口酶质粒(m)

    sc-426346-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    RIOK2双切口酶质粒(m2)

    sc-426346-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    Riok2 编码 RIOK2,这是一种非典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,作为关键装配因子参与 40S 核糖体小亚基在细胞质晚期成熟过程中的组装。RIOK2 通过协调 pre-rRNA 的加工与质量控制,并促进 pre-40S 相关因子的释放与再循环,从而参与核糖体生物发生,将翻译能力与细胞生长和增殖程序联系起来。由于核糖体生成与细胞周期调控及细胞应激反应高度耦联,RIOK2 的扰动可能改变蛋白稳态和整体翻译输出。核糖体生物发生通路的失调被广泛认为与发育异常及增殖性疾病的生物学机制相关,因此 RIOK2 是研究生长调控机制的一个有用关键节点。

    RIOK2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Riok2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Riok2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Riok2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Riok2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。