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RhoB双切口酶质粒(h) | sc-400875-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RhoB双切口酶质粒(h2) | sc-400875-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RHOB 编码小 GTP 酶 RhoB,这是一种与膜相关的调控因子,参与肌动蛋白动态变化和囊泡运输。RhoB 在 GDP 结合态与 GTP 结合态之间循环切换,从而调控细胞形态、黏附与运动性。RhoB 整合来自生长因子受体下游及细胞应激通路的信号,并通过 Rho 家族效应子网络影响内体运输、受体周转以及细胞骨架重塑。它参与细胞迁移、屏障功能以及凋亡或应激适应性反应等过程,将膜运输与转录及细胞骨架层面的输出连接起来。RHOB 信号失调与癌症模型中的侵袭行为改变及治疗应激反应相关,同时也被认为在血管与炎症等背景中发挥更广泛的作用。
RhoB 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RHOB 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RHOB内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RHOB的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RHOB基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。