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RecQL4双切口酶质粒(h) | sc-403224-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RecQL4双切口酶质粒(h2) | sc-403224-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RECQL4 编码一种 RecQ 家族 DNA 解旋酶,通过促进 DNA 复制叉推进、解开异常的 DNA 二级结构并协调 DNA 修复来保障基因组稳定性。RecQL4 参与复制起始,并在同源重组以及依赖末端切除的修复过程等通路中发挥作用,有助于限制复制压力和染色体脆性。RECQL4 的破坏或功能障碍与遗传性基因组不稳定综合征及癌症易感性相关,反映出其在维持忠实 DNA 代谢中的核心作用。因此,RECQL4 常在 DNA 损伤信号传导、S 期检查点控制以及复制相关修复等研究背景下被重点关注。
RecQL4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RECQL4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RECQL4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RECQL4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RECQL4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。