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RBMXL2CRISPR激活质粒(h) | sc-409899-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
RBMXL2CRISPR激活质粒(h2) | sc-409899-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
RBMXL2 编码一种含 RNA 识别基序(RNA recognition motif, RRM)的 RNA 结合蛋白,参与 pre-mRNA 加工并调控可变剪接程序。作为 RBMX/RBMXL 家族成员,RBMXL2 与基因表达的转录后调控相关,可将剪接选择与细胞状态转换及组织特异性的转录组组织方式联系起来。RNA 结合蛋白及剪接体通路的破坏或失调会改变同工型平衡与 RNA 稳定性,而这些过程常与异常增殖、分化缺陷以及基因组应激反应相关。因此,RBMXL2 对于研究剪接因子网络如何塑造 RNA 代谢并影响疾病相关的转录表型具有重要意义。
RBMXL2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性RBMXL2的表达。
RBMXL2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的RBMXL2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于RBMXL2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性RBMXL2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的RBMXL2位点,并能够研究内源性位点上依赖于RBMXL2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在RBMXL2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟RBMXL2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。