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RBCK1双切口酶质粒(h) | sc-402044-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RBCK1双切口酶质粒(h2) | sc-402044-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RBCK1(又称 HOIL-1)编码一种 E3 泛素连接酶,是线性泛素链组装复合体(LUBAC)的核心组成成分,协调 Met1 连接型泛素化事件,从而塑造先天与适应性免疫信号传导。RBCK1 通过调控 NF-κB 的激活以及 TNFR 等受体和某些模式识别受体下游的炎症通路输出,影响细胞因子产生、细胞存活与应激反应。RBCK1 还通过泛素信号网络参与蛋白质稳态(proteostasis)及质量控制通路。RBCK1/LUBAC 活性的失调与免疫及自身炎症表型有关,并在免疫缺陷与组织炎症等研究情境中受到关注。
RBCK1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RBCK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RBCK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RBCK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RBCK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。