Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rb Antibody (IF8): sc-102. Near-infrared western blot analysis of Rb expression in K-562 (A) and MOLT-4 (B) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 680: sc-516180.
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Rb双切口酶质粒(h): sc-400116-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rb 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Rb双切酶质粒（h）和Rb双切酶质粒（h2）编码针对RB1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rb: sc-102，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rb双切口酶质粒(h) | sc-400116-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Rb双切口酶质粒(h2) | sc-400116-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RB1 基因编码视网膜母细胞瘤蛋白（Rb）。Rb 是核心抑癌蛋白，通过结合并抑制 E2F 转录因子、协调 DNA 复制所需的转录程序，从而限制细胞周期在 G1/S 期的推进。Rb 的活性会受到 cyclin D–CDK4/6 和 cyclin E–CDK2 介导的磷酸化动态调控，将促有丝分裂信号与细胞周期检查点、染色质调控以及细胞分化过程整合在一起。通过与 DNA 损伤应答、细胞衰老和细胞凋亡的联系，RB1 有助于维持基因组稳定性并控制细胞的增殖能力。RB1 功能失常在多种癌症中反复出现，并且是视网膜母细胞瘤的标志性致病改变，使 RB1 成为调控肿瘤发生与细胞命运决策通路中的关键枢纽。
Rb 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 RB1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RB1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏RB1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了RB1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。