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RASL11A慢病毒激活颗粒(h) | sc-409106-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
RASL11A 编码一种小型、类 Ras 的 GTP 结合蛋白,属于 RAS 超家族,被认为可通过将鸟嘌呤核苷酸循环与下游通路动态相耦联来调节信号转导。通过影响 Ras 相关的分子开关,RASL11A 参与细胞增殖调控、细胞骨架组织以及与囊泡相关的运输等过程,从而塑造细胞状态及其对压力的响应能力。已有研究在多种癌症与组织重塑情境中观察到 RASL11A 表达模式的改变,这支持其作为一个机制性节点,用于研究致癌信号网络的重编程以及与分化相关的表型。因而,解析 RASL11A 的调控机制有助于理解 Ras 家族网络如何整合影响生长控制与细胞可塑性的各种信号输入。
RASL11A 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 RASL11A 表达。
RASL11A 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在RASL11A转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性RASL11A表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 RASL11A 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。