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Raptor双切口酶质粒(h) | sc-400960-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Raptor双切口酶质粒(h2) | sc-400960-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RPTOR 编码 Raptor,它是 mTOR 复合物 1(mTORC1)的核心支架亚基,负责招募底物并协调营养、生长因子与能量信号,从而调控蛋白质合成、自噬、核糖体生物发生以及脂质代谢。通过磷酸化 S6K、4E-BP1 等下游效应因子,依赖 Raptor 的 mTORC1 活性塑造细胞生长与增殖程序,并将溶酶体信号与合成代谢控制相整合。mTORC1/Raptor 信号失调与多种癌症、代谢性疾病及神经发育相关表型有关,其中翻译调控与自噬过程的改变会促成疾病相关的细胞状态。作为 PI3K–AKT–mTOR 轴以及氨基酸感知通路中的关键节点,Raptor 被广泛用于研究应激反应、线粒体与溶酶体稳态以及信号通路间的串扰。
Raptor 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RPTOR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RPTOR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RPTOR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RPTOR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。