非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
RAP1 抗体 (4C8/1) Alexa Fluor® 647: sc-53434 AF647. Jurkat (A), HL-60 (B), C32 (C), MCF7 (D), K-562 (E) 和 HeLa (F) 全细胞裂解液中 RAP1 表达的直接荧光西部印迹分析. 用 UltraCruz® 阻断试剂: sc-516214 阻断.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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RAP1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-401709
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- RAP1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在RAP1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：RAP1: sc-53434，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
RAP1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-401709 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
TERF2IP 编码 RAP1，它是 shelterin 端粒保护复合体的核心组分之一，可与端粒重复序列结合因子 2（TRF2）相互作用，帮助保护染色体末端，避免不恰当的 DNA 损伤信号激活以及染色体端对端融合。除端粒末端保护外，RAP1 还参与端粒长度稳态维持、端粒处复制压力应答，并通过协调 DNA 修复与检查点通路促进更广泛的基因组稳定性。RAP1 也被认为参与端粒外位点的转录调控，将端粒生物学与染色质状态及基因表达程序联系起来。TERF2IP/RAP1 功能失调与端粒功能障碍表型、基因组不稳定以及在癌症与衰老相关模型中研究的细胞转化过程密切相关。
RAP1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中TERF2IP基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对TERF2IP基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏TERF2IP开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使RAP1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建TERF2IP缺失的细胞模型，用于RAP1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 RAP1 功能至关重要的 TERF2IP 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 TERF2IP 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 RAP1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 RAP1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 TERF2IP 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 RAP1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 RAP1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由TERF2IP同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定TERF2IP靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。