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RANTES双切口酶质粒(h) | sc-401806-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RANTES双切口酶质粒(h2) | sc-401806-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CCL5 编码趋化因子 RANTES,这是一种分泌型配体,主要通过 CCR1、CCR3 和 CCR5 介导信号传导,引导 T 细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和 NK 细胞向免疫激活部位发生趋化迁移。由 RANTES 驱动的受体信号会启动 G 蛋白偶联通路,调控细胞内钙离子通量、PI3K/AKT 与 MAPK 级联反应、整合素激活以及细胞骨架重塑,从而影响白细胞募集与组织炎症。在人体生物学中,CCL5 的表达受炎症相关的转录程序严格调控,并参与淋巴组织与外周组织内免疫细胞的协同转运。CCL5/RANTES 信号失调与慢性炎症性疾病、自身免疫病理以及肿瘤微环境中的免疫浸润相关,因此常被用作研究免疫调控机制的靶点。
RANTES 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CCL5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CCL5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CCL5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CCL5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。