Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RANKL双切口酶质粒(h): sc-400304-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- RANKL 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- RANKL双切酶质粒（h）和RANKL双切酶质粒（h2）编码针对TNFSF11的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：RANKL: sc-377079，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
RANKL双切口酶质粒(h) | sc-400304-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RANKL双切口酶质粒(h2) | sc-400304-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
TNFSF11 编码核因子 κB 受体活化因子配体（RANKL）。RANKL 属于 TNF 超家族的 II 型跨膜蛋白，并可形成可溶性细胞因子；其通过与 TNFRSF11A/RANK 结合传递信号，从而调控破骨细胞的分化、活化与存活。RANKL–RANK 的结合可启动经典与非经典 NF-κB 信号通路，同时激活 MAPK 以及由 NFATc1 驱动的转录程序，协调骨重建过程并与免疫细胞功能相耦联。RANKL 信号失衡与炎症性骨溶解及骨量丢失密切相关，包括骨质疏松和类风湿关节炎相关的关节侵蚀，并促进肿瘤相关的溶骨性微环境形成。由于 RANKL 还会影响树突状细胞与 T 细胞的相互作用以及组织特异性的重塑，TNFSF11 在骨免疫学与骨骼生物学模型中被广泛研究。
RANKL 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 TNFSF11 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TNFSF11内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏TNFSF11的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了TNFSF11基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。