Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rag A Antibody (D-1): sc-518209. Western blot analysis of Rag A expression in BJ (A), U-87 MG (B), PANC-1 (C) and KNRK (D) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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Rag A CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-411501
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rag A CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Rag A基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rag A: sc-518209，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rag A CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-411501 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
RRAGA 编码 Rag A，这是一种与 Ras 相关的小型 GTP 酶，可与 RagC/D 形成异源二聚体，将细胞内氨基酸可用性与溶酶体表面 mTORC1 的激活相耦联。通过在 GDP 结合态与 GTP 结合态之间受调控的循环切换，并与 Ragulator 复合体及 GATOR 调控因子相互作用，Rag A 调控 mTORC1 底物的磷酸化，从而协调蛋白质合成、抑制自噬以及代谢重编程。Rag GTP 酶信号失调和异常的 mTORC1 活性与癌症生物学以及代谢性和神经发育性疾病等背景有关，使 RRAGA 成为解析营养感知线路的一个有用节点。对 RRAGA 进行遗传扰动可用于开展溶酶体依赖性信号及其下游翻译与自噬通路的机制研究。
Rag A CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中RRAGA基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对RRAGA基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏RRAGA开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Rag A蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建RRAGA缺失的细胞模型，用于Rag A信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Rag A 功能至关重要的 RRAGA 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 RRAGA 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Rag A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Rag A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 RRAGA 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Rag A HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Rag A HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由RRAGA同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定RRAGA靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。