Radical Fringe CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-422659
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Radical Fringe CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Radical Fringe基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Radical Fringe CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-422659 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Rfng 编码 Radical Fringe，这是一种定位于高尔基体的 β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶，可修饰 Notch 受体 EGF 样重复序列上的 O-岩藻糖残基，从而调节配体依赖性的 Notch 信号强度。Radical Fringe 通过情境依赖性地增强 Delta-like 与 Jagged/Serrate 的相互作用差异，帮助在发育过程中以及成年干/祖细胞区室中调控细胞命运决定、边界形成与组织模式建成。Fringe 介导的糖基化改变可改变 Notch 通路输出及其下游转录程序，从而影响增殖与分化。Notch 信号失调与多种疾病相关过程有关，因此 Rfng 是在小鼠细胞与体内模型中解析 Notch 驱动表型的一个有用节点。
Radical Fringe CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Rfng基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Rfng基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Rfng开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Radical Fringe蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Rfng缺失的细胞模型，用于Radical Fringe信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Radical Fringe 功能至关重要的 Rfng 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Rfng 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Radical Fringe CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Radical Fringe CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Rfng 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Radical Fringe HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Radical Fringe HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Rfng同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Rfng靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。