Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rad54 Antibody (4E3/1): sc-53433. Western blot analysis of Rad54 expression in K-562 (A), Jurkat (B), HeLa (C) and Ramos (D) nuclear extracts.
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Rad54双切口酶质粒(h): sc-401750-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rad54 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Rad54双切酶质粒（h）和Rad54双切酶质粒（h2）编码针对RAD54L的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rad54: sc-374598，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rad54双切口酶质粒(h) | sc-401750-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Rad54双切口酶质粒(h2) | sc-401750-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RAD54L 编码人源 Rad54 DNA 依赖性 ATP 酶，是同源重组的核心组分之一，可重塑染色质，并在 DNA 双链断裂修复过程中促进 RAD51 介导的链侵入。Rad54 在 Fanconi 贫血/BRCA DNA 修复网络中发挥作用，支持复制叉稳定性，促进复制后修复，并在基因毒性应激下维持基因组完整性。RAD54L 功能受损会扰乱高保真重组，并可能使修复转向易出错通路，从而促进染色体重排以及癌症生物学中常见的突变累积。因此，RAD54L 常被用作研究 DNA 损伤应答信号传导、重组动力学以及基因组不稳定性决定因素的机制切入点。
Rad54 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 RAD54L 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RAD54L内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏RAD54L的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了RAD54L基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。