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Rad51双切口酶质粒(h) | sc-400100-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rad51双切口酶质粒(h2) | sc-400100-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 RAD51 基因编码 Rad51 蛋白,这是一种核心重组酶,在同源重组过程中催化同源序列搜索与 DNA 链交换,从而以高保真方式修复 DNA 双链断裂以及复制叉停滞。Rad51 在 BRCA1/BRCA2 下游发挥作用,并与 RAD52、PALB2 及复制相关因子协同,在 S 期和 G2 期维持基因组稳定性。通过参与复制应激应答、减数分裂重组以及基于染色质的 DNA 修复,RAD51 的活性会影响检查点信号传导和姐妹染色单体交换。RAD51 的表达或功能失调与基因组不稳定表型相关,因此常在肿瘤生物学、遗传性 DNA 修复缺陷以及实验体系中对 DNA 损伤剂敏感性等研究背景下被重点关注。
Rad51 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RAD51 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RAD51内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RAD51的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RAD51基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。