Date published: 2026-8-2

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RACK1双切口酶质粒(m): sc-420608-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • RACK1 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • RACK1双切酶质粒(m)和RACK1双切酶质粒(m2)编码针对Rack1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:RACK1: sc-17754,通过WB, IF或者IHC分析
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    RACK1双切口酶质粒(m)

    sc-420608-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    Rack1 编码活化 C 激酶受体 1(RACK1),这是一种高度保守的 WD40 重复序列支架蛋白,能够组织多蛋白信号复合体,并将受体输入连接到下游激酶通路。在小鼠细胞中,RACK1 可与多种 PKC 亚型结合,整合经由 MAPK/ERK、Src 家族激酶以及 PI3K 相关网络的信号传导;同时它还定位于 40S 核糖体亚基,调控翻译起始以及应激反应相关的蛋白质合成。通过这些作用,RACK1 通过协调黏着斑与细胞骨架重塑通路,影响细胞黏附、极性、迁移和细胞周期进程。RACK1 依赖的信号与翻译调控一旦失衡,常与致癌性信号状态、炎症信号回路以及细胞应激反应改变相关,因此也常成为机制研究的重点靶点。

    RACK1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Rack1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Rack1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Rack1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Rack1基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。