
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
RACK1双切口酶质粒(m) | sc-420608-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Rack1 编码活化 C 激酶受体 1(RACK1),这是一种高度保守的 WD40 重复序列支架蛋白,能够组织多蛋白信号复合体,并将受体输入连接到下游激酶通路。在小鼠细胞中,RACK1 可与多种 PKC 亚型结合,整合经由 MAPK/ERK、Src 家族激酶以及 PI3K 相关网络的信号传导;同时它还定位于 40S 核糖体亚基,调控翻译起始以及应激反应相关的蛋白质合成。通过这些作用,RACK1 通过协调黏着斑与细胞骨架重塑通路,影响细胞黏附、极性、迁移和细胞周期进程。RACK1 依赖的信号与翻译调控一旦失衡,常与致癌性信号状态、炎症信号回路以及细胞应激反应改变相关,因此也常成为机制研究的重点靶点。
RACK1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Rack1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Rack1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Rack1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Rack1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。