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RACK1双切口酶质粒(h) | sc-400800-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
RACK1双切口酶质粒(h2) | sc-400800-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
活化的 C 激酶受体 1(RACK1,也称 GNB2L1)是一种保守的 WD 重复序列支架蛋白,可在核糖体及膜相关复合体处组织多蛋白信号组装体。它协调 PKC 信号、整合素/FAK 介导的黏附、MAPK 通路以及翻译调控之间的串话,从而影响细胞生长、迁移和应激反应。研究表明,RACK1 参与核糖体相关质量控制与选择性 mRNA 翻译的调节,将信号输入与蛋白质稳态(proteostasis)联系起来。RACK1 的表达水平或亚细胞定位改变,常在致癌信号、与转移相关的表型以及利用宿主翻译机器的病毒–宿主相互作用研究中被重点关注。
RACK1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RACK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RACK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RACK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RACK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。