Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rab 7 Antibody (B-3): sc-376362. Western blot analysis of Rab 7 expression in C2C12 (A), 3T3-L1 (B), RAW 264.7 (C), MDA-MB-231 (D) and A549 (E) whole cell lysates and rat lung tissue extract (F).
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Rab 7双切口酶质粒(h): sc-400465-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rab 7 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Rab 7双切酶质粒（h）和Rab 7双切酶质粒（h2）编码针对RAB7A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rab 7: sc-376362，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rab 7双切口酶质粒(h) | sc-400465-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Rab 7双切口酶质粒(h2) | sc-400465-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RAB7A 编码小 GTP 酶 Rab7，是晚期内体成熟、内体–溶酶体运输以及自噬体–溶酶体融合的关键主调控因子。Rab7 通过协调招募 RILP 和 HOPS 系缆复合体等效应蛋白，维持溶酶体降解通路、受体下调以及内体–溶酶体系统中的膜重塑。Rab7 的活性还与营养感知和应激反应相交织，包括线粒体自噬（mitophagy）及更广泛的自噬通量，从而影响蛋白质稳态与细胞器质量控制。RAB7A 介导的运输一旦失调，与神经退行性改变及周围神经病相关表型有关；同时在感染生物学中也具有意义，因为病原体可操纵内体–溶酶体运输过程。
Rab 7 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 RAB7A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RAB7A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏RAB7A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了RAB7A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。