Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rab 5A Antibody (C-3): sc-515401. Western blot analysis of Rab 5A expression in HL-60 (A), Caki-1 (B), MCF7 (C), NIH/3T3 (D) and PC-12 (E) whole cell lysates.
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Rab 5A CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-435445
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rab 5A CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Rab 5A基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rab 5A: sc-515401，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rab 5A CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-435445 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Rab5a 编码小 GTP 酶 Rab5A。Rab5A 是早期内体动态的核心调控因子，通过 EEA1 等效应蛋白以及 PI3K 信号节点，协调网格蛋白介导的内吞作用、囊泡对接/融合与内体成熟。通过控制受体的内吞与转运，Rab5A 影响包括 EGFR/MAPK 和 PI3K/AKT 在内的信号通路的下游信号强度与持续时间，并参与膜回收以及将货物分选至溶酶体降解。Rab5A 活性还可通过内体–肌动蛋白串扰与细胞骨架重塑、神经突起生长相关联。Rab5a 相关的内吞转运失调已被认为与神经退行性疾病相关的内体缺陷、免疫受体处理异常，以及增殖性疾病模型中生长因子受体信号异常有关。
Rab 5A CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Rab5a基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Rab5a基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Rab5a开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Rab 5A蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Rab5a缺失的细胞模型，用于Rab 5A信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Rab 5A 功能至关重要的 Rab5a 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Rab5a 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Rab 5A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Rab 5A CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Rab5a 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Rab 5A HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Rab 5A HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Rab5a同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Rab5a靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。