Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rab 27a Antibody (E-8): sc-74586. Near-infrared western blot analysis of Rab 27a expression in non-transfected 293T: sc-117752 (A), mouse Rab 27a transfected 293T: sc-122891 (B) and SK-MEL-28 (C) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Detection reagent used: m-IgGκ BP-CFL 790: sc-516181.
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Rab 27a双切口酶质粒(m): sc-419219-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rab 27a 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Rab 27a双切酶质粒（m）和Rab 27a双切酶质粒（m2）编码针对Rab27a的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rab 27a: sc-74586，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rab 27a双切口酶质粒(m) | sc-419219-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Rab 27a双切口酶质粒(m2) | sc-419219-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Rab27a 编码小型 GTP 酶 Rab27a，这是一种膜运输调控因子，控制分泌囊泡与质膜的对接与融合。在小鼠细胞中，Rab27a 通过与 melanophilin、Slp/Exophilin 蛋白以及 Munc13-4 等效应蛋白相互作用来协调受调控的胞吐过程，从而支持包括黑素体运输、细胞毒性颗粒释放以及血小板致密颗粒分泌等生物学过程。该通路与肌动蛋白依赖的囊泡运输、溶酶体相关细胞器生物发生以及免疫突触功能相互交叉。遗传模型研究表明，Rab27a 活性失调与色素表型和免疫功能障碍相关，因此它是研究囊泡动力学与细胞器稳态的一个有用关键节点。
Rab 27a 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Rab27a 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Rab27a内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Rab27a的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Rab27a基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。