Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
Rab 25 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-424753
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Rab 25 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Rab 25基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Rab 25: sc-65978，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Rab 25 CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-424753 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Rab25 编码小GTP酶 Rab25，属于 Rab11 亚家族成员，负责调控膜运输过程，包括上皮细胞中的内吞再循环，以及受体和整合素的极性运输。通过控制囊泡的出芽、系留与融合，Rab25 影响细胞极性、迁移，以及与 PI3K–AKT 等通路耦联的细胞表面受体所产生的信号输出，并参与生长因子受体的再循环。RAB25 活性失调与多种组织中上皮稳态改变及肿瘤相关表型有关，因此适用于研究侵袭、与转移相关的运输程序，以及其在不同情境下可能呈现的致癌或抑癌功能。在小鼠模型中，扰动 Rab25 有助于从机制层面解析发育与疾病相关细胞行为中的囊泡运输网络。
Rab 25 CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Rab25基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Rab25基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Rab25开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Rab 25蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Rab25缺失的细胞模型，用于Rab 25信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Rab 25 功能至关重要的 Rab25 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Rab25 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Rab 25 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 Rab 25 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Rab25 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Rab 25 HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 Rab 25 HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Rab25同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Rab25靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。