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Rab 11A双切口酶质粒(h) | sc-400617-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Rab 11A双切口酶质粒(h2) | sc-400617-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
RAB11A 编码小GTP酶 Rab 11A,它是回收内体动态与膜运输的核心调控因子,负责协调内吞回收、囊泡出芽以及货物向质膜递送等过程。Rab 11A 与 Rab11 家族相互作用蛋白及外排体(exocyst)协同作用,调控受体回收、整合素周转、极性运输和胞质分裂末期的断裂(abscission),从而与细胞骨架重塑和细胞迁移相联系。通过对信号受体和细胞连接组分的分选与转运,Rab 11A 影响塑造上皮细胞极性及生长因子应答的相关通路。Rab11A 依赖的运输发生失调在癌症模型中与侵袭和转移行为改变有关,而内体回收受扰也被认为参与了神经退行性疾病与感染性疾病的发生机制。
Rab 11A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 RAB11A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对RAB11A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏RAB11A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了RAB11A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。