R-Spondin2慢病毒激活颗粒(h): sc-402648-LAC

人类 RSPO2 基因编码 R-Spondin2，这是一种分泌型基质细胞蛋白样配体。它通过与 LGR4/5/6 受体结合并拮抗泛素连接酶 RNF43/ZNRF3，从而稳定细胞表面的 Frizzled 受体，进而增强经典 WNT/β-连环蛋白信号通路。通过这一机制，R-Spondin2 调控上皮干细胞的维持与增殖以及组织形态发生，并对控制分化与细胞命运的转录程序产生下游影响。RSPO2 的活性还与调控细胞外基质重塑和发育模式形成的通路发生交叉；其表达异常与癌症中 WNT 信号失调相关，同时在实验系统中也被发现与先天性表型和炎症表型有关。这些特征使 RSPO2 成为在人类细胞模型中解析 WNT 通路精细调控、受体–配体动力学以及情境依赖性信号输出的一个有用关键节点。

R-Spondin2 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 RSPO2 表达。

R-Spondin2 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在RSPO2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性R-Spondin2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 RSPO2 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。