Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PYK2 Antibody (5E2D5): sc-130077. Western blot analysis of PYK2 expression in untreated (A) and chemically-treated (B) K-562 whole cell lysates. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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PYK2双切口酶质粒(h): sc-400708-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PYK2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PYK2双切酶质粒（h）和PYK2双切酶质粒（h2）编码针对PTK2B的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PYK2: sc-393181，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PYK2双切口酶质粒(h) | sc-400708-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PYK2双切口酶质粒(h2) | sc-400708-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 PTK2B 基因编码非受体型酪氨酸激酶 PYK2，它是与黏着斑相关的信号枢纽，可在整合素、生长因子受体、趋化因子受体以及 Ca2+/PKC 输入的下游被激活。PYK2 协调涉及 Src 家族激酶、FAK、MAPK/ERK 和 PI3K-AKT 的磷酸化级联反应，从而调控细胞骨架重塑、黏附周转、细胞迁移以及囊泡运输。它还参与先天免疫与炎症信号传导，包括与白细胞激活和小胶质细胞反应相关的通路。PTK2B/PYK2 信号失调与细胞运动性和生存程序的改变有关，这些变化与肿瘤生物学相关；同时也在遗传与功能层面与神经炎症及神经退行性疾病机制存在关联。
PYK2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PTK2B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PTK2B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PTK2B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PTK2B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。