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PXR双切口酶质粒(h) | sc-400824-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PXR双切口酶质粒(h2) | sc-400824-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NR1I2 编码孕烷 X 受体(PXR),这是一种配体激活的核受体,作为外源性化合物传感器,将化学暴露与解毒程序的转录调控连接起来。PXR 被激活后与 RXR 形成异源二聚体,并结合相应反应元件,从而调控参与 I/II 期代谢与转运的基因,包括 CYP3A、UGT 以及 ABC 转运体,并与胆汁酸、脂质及炎症信号通路发生整合。该调控网络影响肝脏与肠道稳态,并塑造细胞对药物和环境化学物的反应。PXR 信号失调与药物代谢差异及药物相互作用、胆汁淤积与代谢表型,以及在炎症相关疾病和肿瘤生物学中依赖情境的效应有关。
PXR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 NR1I2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NR1I2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏NR1I2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了NR1I2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。