PTPζCRISPR激活质粒(h): sc-401775-ACT

PTPRZ1 编码蛋白酪氨酸磷酸酶受体 Z1 型（PTPζ），这是一种在中枢神经系统中富集的受体样磷酸酶，可调控细胞表面蛋白的酪氨酸磷酸化状态。PTPζ 能整合来自多效蛋白（pleiotrophin）和 midkine 等配体的细胞外信号，从而影响细胞黏附、迁移以及神经突起生长，并与包含 SRC 家族激酶、MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 通路在内的信号网络发生互作。通过调节胶质细胞与神经祖细胞的行为，PTPRZ1 参与神经组织的发育过程以及依赖神经活动的相关过程。PTPRZ1 的表达或信号传导异常与神经炎症状态、脱髓鞘病理以及胶质瘤生物学有关，因此常用于研究神经信号机制及微环境相互作用。

PTPζ CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PTPRZ1的表达。

PTPζ CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的PTPRZ1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于PTPRZ1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性PTPζ表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的PTPRZ1位点，并能够研究内源性位点上依赖于PTPζ的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PTPRZ1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PTPζ通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。