
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PSMD11CRISPR激活质粒(h) | sc-410966-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
PSMD11 编码 26S 蛋白酶体盖帽(lid)上的一种非 ATP 酶调控亚基,参与支持泛素依赖的蛋白降解与蛋白质稳态。通过促进蛋白酶体的高效组装与底物处理,PSMD11 影响细胞周期调控因子、转录因子以及错误折叠蛋白的周转,从而与细胞周期控制、应激反应和抗原加工等通路相关。蛋白酶体调控亚基活性的改变与蛋白质稳态紊乱以及在癌症和神经退行性疾病相关情境中观察到的细胞适应性程序有关。因此,PSMD11 常被用作研究人类细胞中蛋白酶体容量和抵御蛋白毒性应激能力的调节因子。
PSMD11 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PSMD11的表达。
PSMD11 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的PSMD11基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于PSMD11转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性PSMD11表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的PSMD11位点,并能够研究内源性位点上依赖于PSMD11的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PSMD11表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PSMD11通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。