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PSF双切口酶质粒(h) | sc-402024-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PSF双切口酶质粒(h2) | sc-402024-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SFPQ 编码剪接因子富含脯氨酸和谷氨酰胺的蛋白(PSF)。PSF 是一种多功能的核内 RNA/DNA 结合因子,可将转录与 pre‑mRNA 剪接、3′ 端加工以及 RNA 的核内滞留过程相耦联。PSF 通过与 NEAT1 长链非编码 RNA(lncRNA)及相关 DBHS 家族蛋白相互作用,参与旁斑(paraspeckles)的组装与调控,从而在应激反应中影响基因表达程序。除 RNA 代谢外,PSF 还可在 DNA 损伤位点通过蛋白–蛋白相互作用调节 DNA 双链断裂修复及与复制相关的过程,从而促进基因组维护。SFPQ 的失调或定位改变与癌症和神经退行性疾病中观察到的异常剪接及转录调控有关,因此它是研究人类细胞中依赖 RNA 加工的疾病机制的一个重要节点。
PSF 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SFPQ 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SFPQ内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SFPQ的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SFPQ基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。