Each CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid product consists of a pool of 3 plasmids designed to ensure identification and cleavage of a specific gene for maximum knockout efficiency. Each plasmid encodes a unique 20 nt sequence derived from the GeCKO (v2) library.
PRX IV CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-424704
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PRX IV CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（m） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在PRX IV基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PRX IV: sc-376668，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PRX IV CRISPR/Cas9 KO质粒 (m) | sc-424704 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
Prdx4 编码过氧化还原蛋白 IV（PRX IV），这是一种定位于内质网（ER）的硫醇依赖性过氧化物酶，可将过氧化氢和有机氢过氧化物还原，从而在分泌蛋白和膜蛋白产生细胞中维持氧化还原稳态。在内质网腔内，PRX IV 通过将过氧化物解毒与二硫键形成相偶联，帮助塑造氧化性蛋白折叠过程，并在 ER 应激时影响蛋白质稳态以及未折叠蛋白反应（UPR）信号传导。通过调控局部活性氧（ROS）水平，PRX IV 还能调节氧化还原敏感通路，从而影响炎症、细胞存活和代谢适应。内质网氧化还原平衡失调及 PRX IV 活性异常与氧化应激相关表型有关，这些表型与肿瘤生物学、代谢性疾病和炎症过程密切相关，因此 Prdx4 是在小鼠系统中开展机制研究的一个有用节点。
PRX IV CRISPR/Cas9 KO质粒（m）是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Prdx4基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对Prdx4基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏Prdx4开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使PRX IV蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建Prdx4缺失的细胞模型，用于PRX IV信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 PRX IV 功能至关重要的 Prdx4 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 Prdx4 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 PRX IV CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 PRX IV CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Prdx4 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 PRX IV HDR 质粒（m）编码的 HDR 供体构建体以及 PRX IV HDR质粒（m2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由Prdx4同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Prdx4靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。