PRP4 kinase慢病毒激活颗粒(h2): sc-411224-LAC-2

人类PRPF4B基因编码PRP4激酶，这是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，可与U4/U6·U5三snRNP复合体结合，并通过磷酸化剪接体组分来调控pre-mRNA剪接，从而支持剪接体的组装与催化激活。PRP4激酶通过控制剪接位点的选择和转录本成熟，将细胞核内RNA加工与细胞周期进程以及依赖协同基因表达的应激响应信号程序联系起来。PRPF4B表达或活性失调与癌症及其他RNA加工异常相关疾病中观察到的异常剪接模式有关，因此在研究转录组重塑与蛋白质组多样性方面具有重要意义。在人类细胞中对PRPF4B进行基因编辑，可用于机制性解析剪接体动态、剪接因子的磷酸化调控，以及对可变剪接、DNA损伤应答和细胞表型等下游影响，为功能基因组学工作流程提供支撑。

PRP4 kinase 慢病毒激活颗粒（h2）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PRPF4B 表达。

PRP4 kinase 慢病毒激活颗粒（h2）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在PRPF4B转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性PRP4 kinase表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 PRPF4B 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。