The Double Nickase Plasmid features a U6 promoter for sgRNA expression, a 20 nt targeting sequence, and a gRNA scaffold to guide Cas9n. It includes a CBh promoter for Cas9n (D10A) and puromycin resistance, GFP for transfection verification, and nuclear localization signals (NLS). The 2A peptide allows co-expression of Cas9n and Puro from a single promoter, enabling precise genome editing with reduced off-target effects.
Progesterone Receptor双切口酶质粒(m): sc-422214-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Progesterone Receptor 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Progesterone Receptor双切酶质粒（m）和Progesterone Receptor双切酶质粒（m2）编码针对Pgr的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Progesterone Receptor: sc-398898，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Progesterone Receptor双切口酶质粒(m) | sc-422214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Progesterone Receptor双切口酶质粒(m2) | sc-422214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Pgr 基因编码孕激素受体（PGR），这是一种由配体激活的核激素受体，可作为转录因子协调孕激素依赖性的基因表达。激素结合后，PGR 会调控染色质可及性以及转录程序，并与共调节因子网络和多条信号通路发生交叉，从而影响细胞周期进程、分化与炎症反应。在生殖组织中，PGR 是子宫容受性、胚胎着床、蜕膜化以及乳腺发育的关键枢纽，将内分泌信号与组织重塑相连接。Pgr 信号失调以及受体同工型比例的改变，常被作为不孕模型、子宫内膜生物学研究以及激素反应性肿瘤发生模型中的典型实验特征。
Progesterone Receptor 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Pgr 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pgr内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Pgr的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Pgr基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。