Progesterone ReceptorCRISPR激活质粒(h): sc-400198-ACT

PGR 编码人孕激素受体（progesterone receptor），这是一种配体激活的核激素受体，可作为转录因子协调孕激素依赖的基因表达程序。与激素结合后，PGR 通过与类固醇受体共调控因子以及 MAPK/PI3K 通路的串扰，调控染色质可及性与转录网络，从而影响生殖组织发育、细胞周期进程、分化和炎症信号传导。不同同工型（PR-A 与 PR-B）的特异性活性塑造了在子宫内膜、乳腺和卵巢等组织中的情境依赖性反应，进而影响上皮–基质间通讯与激素反应性。PGR 信号失调及受体表达改变常见于对激素敏感的癌症和生殖相关疾病研究中，并可影响增殖、侵袭以及内分泌耐药机制。

Progesterone Receptor CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PGR的表达。

Progesterone Receptor CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的PGR基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于PGR转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Progesterone Receptor表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的PGR位点，并能够研究内源性位点上依赖于Progesterone Receptor的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PGR表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Progesterone Receptor通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。