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PRMT2CRISPR激活质粒(h) | sc-405107-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
PRMT2(蛋白精氨酸甲基转移酶2)是一种人源SAM(S-腺苷甲硫氨酸)依赖性酶,能够催化组蛋白及非组蛋白底物上的精氨酸甲基化,从而塑造染色质可及性与转录输出。通过调控蛋白–蛋白相互作用和表观遗传信号传递,PRMT2影响包括转录调控、RNA加工以及细胞周期控制在内的多种过程。PRMT2的活性与核受体及炎症相关的转录程序相互交织,使其调控与控制细胞分化和应激反应的通路相关联。PRMT2表达改变或甲基化依赖性信号异常,已与多种疾病相关情境中观察到的基因表达失衡状态相关,这也支持在机制研究与通路导向研究中对其开展深入探究。
PRMT2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性PRMT2的表达。
PRMT2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的PRMT2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于PRMT2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性PRMT2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的PRMT2位点,并能够研究内源性位点上依赖于PRMT2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在PRMT2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟PRMT2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。