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Presenilin 2慢病毒激活颗粒(h) | sc-403532-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
PSEN2 编码早老素2(presenilin 2),是 γ-分泌酶(γ-secretase)复合体的催化核心组分之一。该复合体介导多种 I 型膜蛋白(包括 APP 和 Notch 受体)的膜内蛋白水解。通过受调控的切割事件,早老素2参与 Notch 信号传导、APP 加工处理,并进一步影响细胞命运决定、突触功能及炎症反应。PSEN2 还会影响内体-溶酶体运输、钙稳态和线粒体功能,从而将 γ-分泌酶活性与蛋白质稳态及细胞应激通路联系起来。PSEN2 的遗传与功能改变与神经退行性及神经炎症性疾病机制有关,因此成为在神经元与胶质细胞系统中开展通路导向研究的重要靶点。
Presenilin 2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PSEN2 表达。
Presenilin 2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PSEN2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Presenilin 2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PSEN2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。