Date published: 2026-7-21

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PRDM9双切口酶质粒(h): sc-412740-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • PRDM9 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • PRDM9双切酶质粒(h)和PRDM9双切酶质粒(h2)编码针对PRDM9的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    订购信息

    产品名称产品编号规格价格数量收藏夹

    PRDM9双切口酶质粒(h)

    sc-412740-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    PRDM9双切口酶质粒(h2)

    sc-412740-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    PRDM9 编码一种减数分裂特异的组蛋白赖氨酸甲基转移酶兼 DNA 结合因子。它通过识别特定序列基序并沉积 H3K4me3 与 H3K36me3 标记来指定重组热点的位置。PRDM9 依靠其 KRAB、PR/SET 和锌指结构域,协调染色质重塑并招募减数分裂重组机器,从而启动程序化 DNA 双链断裂的形成以及同源染色体的正确配对。PRDM9 锌指阵列的变异是决定热点使用情况与交叉互换分布的主要因素之一,将 PRDM9 的功能与基因组稳定性和生殖生物学联系起来。PRDM9 活性失调或异位表达也被用于探讨异常表观遗传模式与基因组重排等问题,因此与突变过程及生殖系完整性的研究相关。

    PRDM9 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PRDM9 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PRDM9内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PRDM9的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PRDM9基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。