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PPARα双切口酶质粒(h) | sc-400238-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PPARα双切口酶质粒(h2) | sc-400238-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PPARA 编码过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα),这是一种配体调控的核受体,可与 RXR 形成异源二聚体,从而控制参与脂肪酸摄取、β-氧化以及脂蛋白代谢等过程的基因转录。PPARα 协调肝脏、心脏、骨骼肌及其他以氧化代谢为主的组织的代谢适应,将营养与脂质信号与线粒体和过氧化物酶体的能量通路整合起来。通过调控脂质处理、酮体生成以及炎症基调,PPARα 将细胞能量平衡与应激反应和免疫代谢信号联系起来。PPARA 活性异常与血脂紊乱、脂肪肝表型、胰岛素抵抗以及更广泛的心代谢疾病生物学相关,因此成为研究代谢调控机制的重要靶点。
PPARα 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PPARA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PPARA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PPARA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PPARA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。