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PP2A-Cα双切口酶质粒(h) | sc-400613-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PP2A-Cα双切口酶质粒(h2) | sc-400613-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PPP2CA 编码蛋白磷酸酶 2A(PP2A)的催化亚基 Cα,是一种重要的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶。PP2A 可与支架亚基 A 以及多种调控亚基 B 组装形成异源三聚体复合物,从而决定底物特异性。PP2A-Cα 在细胞周期推进、DNA 损伤应答和细胞骨架动态等过程中调控依赖磷酸化的信号传导,并在 MAPK、PI3K/AKT 和 Wnt/β-catenin 等通路的调节中发挥突出作用。通过协同去磷酸化关键激酶与结构蛋白,PPP2CA 有助于维持蛋白稳态以及检查点的准确性。PP2A 活性失衡及 PPP2CA 功能改变与多种癌症和神经退行性疾病中观察到的异常磷酸化网络相关,因此常被作为信号研究中的关键机制节点。
PP2A-Cα 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PPP2CA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PPP2CA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PPP2CA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PPP2CA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。