Pol III RPC32慢病毒激活颗粒(h): sc-417072-LAC

POLR3G 编码 Pol III 的 RPC32，是 RNA 聚合酶 III 的核心亚基之一，负责支持小分子非编码 RNA（包括 tRNA、5S rRNA 及其他调控性 RNA）的转录；这些 RNA 对翻译能力、细胞生长以及蛋白质稳态至关重要。RPC32 参与 Pol III 复合体的组装和依赖启动子的转录起始，并与将营养感知和增殖信号与生物合成输出相耦联的通路整合。Pol III 活性改变及小 RNA 生成失调常在致癌转化、细胞应激反应以及由胞质 RNA 物种触发的先天免疫信号等背景下被研究。因此，POLR3G 为探究非编码 RNA 生物发生的转录调控及其对细胞状态决策的影响提供了一个机制切入点。

Pol III RPC32 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 POLR3G 表达。

Pol III RPC32 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在POLR3G转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Pol III RPC32表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 POLR3G 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。