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PMS2双切口酶质粒(h) | sc-401600-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PMS2双切口酶质粒(h2) | sc-401600-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PMS2 编码 DNA 错配修复(MMR)机制的核心组分之一,与 MLH1 形成 MutLα 异源二聚体,协同识别并处理复制过程中产生的碱基–碱基错配以及插入–缺失环。PMS2 通过 ATP 酶驱动的构象切换和内切酶活性,将错配识别与后续的切除、再合成与连接过程相耦联,从而维持基因组稳定性并限制突变发生。PMS2 的功能还与复制保真性、检查点信号传导以及细胞对 DNA 损伤的应答相互衔接。PMS2 的破坏或失调与微卫星不稳定性升高及高突变表型相关,这些现象对遗传性癌症易感性及 DNA 修复相关疾病机制的研究具有重要意义。
PMS2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PMS2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PMS2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PMS2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PMS2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。