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PMP22双切口酶质粒(m) | sc-422323-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
外周髓鞘蛋白22(peripheral myelin protein 22,PMP22)由小鼠 Pmp22 基因编码,是一种四跨膜糖蛋白,在雪旺细胞和致密髓鞘中高度富集,在这些部位它有助于调控髓鞘膜的组成与稳定性以及周围神经传导。PMP22 参与膜运输与蛋白质稳态(proteostasis)相关通路,包括内质网(ER)质量控制和内体–溶酶体周转,使其丰度与髓鞘稳态及雪旺细胞分化程序相联系。PMP22 的剂量改变或错误折叠与周围神经病变表型密切相关,因此 Pmp22 是研究周围神经系统中髓鞘化、轴突–胶质相互作用以及应激反应信号的关键节点。
PMP22 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Pmp22 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Pmp22内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Pmp22的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Pmp22基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。