非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PLIC-2 抗体 (QR-2): sc-100612. A-431 全细胞裂解液中 PLIC-2 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
PLIC-2双切口酶质粒(h): sc-404783-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PLIC-2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PLIC-2双切酶质粒（h）和PLIC-2双切酶质粒（h2）编码针对UBQLN2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PLIC-2: sc-100612，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PLIC-2双切口酶质粒(h) | sc-404783-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PLIC-2双切口酶质粒(h2) | sc-404783-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
UBQLN2 编码 ubiquilin-2（PLIC-2），这是一种同时含有泛素样结构域与泛素结合结构域的蛋白，能够将多聚泛素化底物转运至 26S 蛋白酶体，并参与内质网相关降解（ERAD）与自噬过程。PLIC-2 通过把被泛素化的货物连接到蛋白酶体来支持蛋白质质量控制，影响错误折叠或易聚集蛋白的周转，并在细胞应激时维持蛋白稳态。UBQLN2 依赖的清除通路失调与神经退行性表型相关，其特征包括泛素阳性包涵体以及蛋白酶体功能受损，因此它是在人类细胞中模拟蛋白稳态缺陷的一个重要靶点。在生物医学研究中，扰动 UBQLN2 常用于研究泛素信号传导、应激颗粒与蛋白聚集体生物学，以及蛋白酶体降解与自噬通量之间的串扰。
PLIC-2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 UBQLN2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对UBQLN2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏UBQLN2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了UBQLN2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。