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plexin-B1慢病毒激活颗粒(h) | sc-401840-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
PLXNB1 编码 plexin-B1,这是一种单跨膜受体,能够结合 4 类 semaphorin,并调控细胞骨架重塑、细胞迁移、黏附以及轴突导向。通过与 Rho 家族 GTP 酶及 MET、ERBB2 等信号中介分子的相互作用,plexin-B1 将细胞外 semaphorin 信号与肌动蛋白动态变化和细胞运动程序连接起来。plexin-B1 的活性会影响血管生成和神经元模式形成过程,并且在与疾病相关的细胞模型中可调节侵袭行为以及与上皮–间质转化(EMT)相关的通路。PLXNB1 表达或信号传导的改变,与神经发育研究和肿瘤生物学研究中观察到的导向与迁移失调表型有关。
plexin-B1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PLXNB1 表达。
plexin-B1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PLXNB1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性plexin-B1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PLXNB1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。