Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PKR Antibody (13): sc-136038. Western blot analysis of PKR expression in A-431 whole cell lysate.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
PKR双切口酶质粒(h): sc-400177-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- PKR 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- PKR双切酶质粒（h）和PKR双切酶质粒（h2）编码针对EIF2AK2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：PKR: sc-6282，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
PKR双切口酶质粒(h) | sc-400177-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
PKR双切口酶质粒(h2) | sc-400177-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EIF2AK2 编码 PKR（一种可被干扰素诱导的丝氨酸/苏氨酸激酶），在抗病毒与先天免疫应答过程中作为细胞质内的双链 RNA 传感器发挥作用。PKR 被激活后会磷酸化 eIF2α，从而抑制翻译起始，重塑细胞蛋白质稳态，并促进诸如整合应激反应等应激适应性程序。PKR 还与 NF-κB 和 MAPK 信号通路发生交叉，参与炎症基因表达、细胞凋亡以及自噬调控。EIF2AK2/PKR 活性失调与宿主-病原体相互作用改变、慢性炎症以及多种疾病背景下观察到的应激相关信号改变有关，因此可作为免疫学与细胞应激研究中的关键机制节点。
PKR 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EIF2AK2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EIF2AK2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EIF2AK2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EIF2AK2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。