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Pitx2双切口酶质粒(h) | sc-401426-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Pitx2双切口酶质粒(h2) | sc-401426-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
PITX2 编码 Pitx2,这是一种同源盒(homeobox)转录因子,在胚胎发生及成人稳态维持过程中调控细胞命运决定与组织模式形成。Pitx2 在 Wnt/β-连环蛋白信号通路下游发挥作用,并与 TGF-β 及维甲酸(retinoic acid)响应的转录程序整合,从而控制增殖、分化及形态发生过程。在人体生物学中,PITX2 表达改变或其调控变异与涉及眼部及颅面结构的发育障碍有关,也与癌症以及心脏电生理相关背景中的转录网络失调相关。这些通路层面的关联使 PITX2 成为研究基因调控回路、谱系决定以及情境依赖性转录调控的一个有价值节点。
Pitx2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 PITX2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PITX2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏PITX2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了PITX2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。