Date published: 2026-7-21

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PiT1双切口酶质粒(m): sc-422988-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • PiT1 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • PiT1双切酶质粒(m)和PiT1双切酶质粒(m2)编码针对Slc20a1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    PiT1双切口酶质粒(m)

    sc-422988-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    小鼠 Slc20a1 基因编码 III 型钠依赖性磷酸盐转运体 PiT1。PiT1 是一种广泛表达的膜蛋白,介导无机磷酸盐摄取,以支持核苷酸合成、磷脂代谢和细胞生物能量学。PiT1 将磷酸盐可用性与细胞周期推进和生存信号相整合,并已在多种细胞类型中与增殖调控和应激反应相关联。除维持磷酸盐稳态外,PiT1 还参与与矿化相关的过程,以及由磷酸盐驱动、与代谢和发育通路交叉的信号网络。磷酸盐转运及 PiT1 相关通路的失调,与疾病相关模型体系中对钙化生物学、代谢重塑和增殖表型的研究密切相关。

    PiT1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Slc20a1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Slc20a1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Slc20a1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Slc20a1基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。