PIEZO1慢病毒激活颗粒(h): sc-410555-LAC

PIEZO1 编码一种机械敏感的非选择性阳离子通道，可将细胞膜张力与剪切应力转化为 Ca²⁺ 内流，从而在多种细胞类型中实现快速的机械信号转导。PIEZO1 信号调控多种依赖钙的过程，包括内皮细胞对血流的感知、细胞骨架重塑、细胞体积控制，以及与炎症和组织稳态相关的下游转录反应。在红细胞和血管细胞中，PIEZO1 活性影响离子平衡与膜稳定性，并与调控水合状态和力学生物学的通路相联系。PIEZO1 功能失调与遗传性红细胞疾病以及淋巴或血管相关表型有关，因此成为在人类疾病模型中研究力依赖信号传导的重要靶点。

PIEZO1 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PIEZO1 表达。

PIEZO1 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在PIEZO1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性PIEZO1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 PIEZO1 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。